酶標儀即酶聯(lián)免疫檢測儀,酶標儀檢測技術是一種高通量微孔板檢測技術,操作簡便,被廣泛應用于生命科學、生物制藥、體外診斷、食品安全、環(huán)境科學等領域。傳統(tǒng)酶標儀是指具備吸收光檢測功能的酶聯(lián)免疫檢測儀,隨著科學技術發(fā)展和市場需求不斷豐富,如今酶標儀所具備的檢測功能日益豐富,在光吸收檢測(Abs)基礎上增加了熒光強度(FI)、發(fā)光檢測(Lum)、熒光偏振(FP)、時間分辨熒光(TRF)、勻相時間分辨熒光(HTRF)等多種檢測技術。然而每一種技術都具有的應用價值和局限性,下面將對幾個主流技術進行詳細介紹。
工作原理與主要結構和光電比色計基本相同,在特定波長下檢測被測物的吸光值,稱為光吸收檢測(Absorbance,Abs)。只做吸收光檢測的酶標分析儀實際上就是一臺變相光電比色計或分光光度計,其基本工作原理與主要結構和光電比色計基本相同。光源發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,進入塑料微孔板中的待測標本。
熒光(Fluorescence)是一些原子和分子吸收特定波長的光(激發(fā):Ex),隨后短暫發(fā)射 (Em) 更長波長的光的特性。激發(fā)峰和發(fā)射峰之間的距離稱為斯托克斯 (Stokes) 位移,該位移取決于熒光基團。熒光利用一個外部光源,在特定波長下激發(fā)樣品,熒光基團受到適當波長的激發(fā),分子從基態(tài)轉化成激發(fā)態(tài)。隨著分子回到基態(tài),能量會以熱(損失能量)和能量更低、波長更長的光的形式釋放。